外科手术治疗的成败与手术中的无菌操作有着密切的关系，正确掌握无菌技术是预防切口感染，保证病人安全的关键性问题。每位医护人员都必须充分理解洁净手术室无菌操作的重要性，才能在手术室各项工作中更好地执行无菌操作。所有参加手术的人员必须认真执行规章，即北京洁净手术室无菌操作原则。如有违反，应立即纠正。
1.建立一个无菌区
北京洁净手术室无菌区内所有物品都必须是灭菌的，如果稍有怀疑应立即更换。有下列情况的物品应视为有菌，不能在无菌区内使用：①在非限制区内的灭菌敷料;②无菌包破损或潮湿;③无菌包坠落在地面上;④灭菌有效时间及效果不能肯定;⑤怀疑无菌物已被污染。北京洁净手术室无菌区的建立应尽量接近使用时间，以减少暴露和污染的机会。
2.无菌手术衣的应用
无菌手术衣的无菌范围仅限于前身肩平面以下，腰平面以上及袖子。其他部位应视为有菌区。手术人员在穿好手术衣后，前臂不应下垂，应保持在腰平面以上。双手不应接近面部或交叉及放于腋下，应肘部内收，靠近身体。由于手术衣在腰平面以下视为有菌的，因而不应接触无菌桌及铺好的手术台。手术人员倚墙而立或靠坐在未经灭菌的地方，均是违反北京洁净手术室无菌原则的。
3.无菌桌的无菌范围
北京洁净手术室无菌桌仅桌缘平面以上是无菌，桌缘平面以下，不能长时间保持无菌完整，应视为有菌。手术护士、巡回护士都不应接触无菌桌缘平面以下的桌布，以建立一个安全地带。凡坠落于手术台边或无菌桌缘平面以下的物品应视为有菌。已坠落下去的皮管、电线、缝线不应再向上提拉或再用。无菌布单被水或血浸湿时，应加盖或更换新的无菌单。
4.减少空气污染、保持空气净化效果
北京洁净手术室门窗应关闭，人员进出应走侧门，尽量减少在北京洁净手术间内走动，避免引起阵风。手术进行中应保持肃静，避免不必要的谈话。咳嗽、打喷嚏时应将头转离无菌区，避免飞沫污染。为防手术人员滴汗，可于额部加一无茵汗带。请他人擦汗时，头应转向一侧，不使纱布纤维落入无菌区。